抗体疗法
近年来,由于单克隆抗体的高特异性、活性和良好的药代动力学,以及成功地将抗体设计成人源化形式的策略,单克隆抗体用于癌症治疗已经取得了相当大的成功。抗体能够召集免疫系统通过补体依赖的细胞毒性或抗体依赖的细胞毒性来攻击癌细胞(Liu和Mardis 2017)。抗体介导的细胞凋亡直接杀死肿瘤细胞的机制包括细胞表面结合酶的中和和受体激动剂或拮抗剂活性的诱导。
在另一种方法中,抗体通过抗体-药物偶联物(adc)传递靶向癌细胞的药物。adc通过与癌细胞表面抗原选择性结合、内化和细胞内药物释放,将细胞毒性化合物导向肿瘤细胞(Wold et al. 2016)。此外,adc是治疗淋巴瘤和实体瘤的强有力的新选择,免疫调节抗体最近取得了显著的临床成功。蛋白质工程技术的新进展也产生了多种双特异性抗体(BsAb)格式,能够作为单一药物靶向多种抗原,直接靶向免疫细胞肿瘤,从而减少耐药性和严重的副作用(Thakur等,2018)。
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在融合克隆该技术通过加快抗体表达结构的生成,增强了抗体发现和工程工作流程。融合克隆具有快速(15分钟)、高效(>95%克隆效率)、序列无关(任何PCR插入都可以克隆到任何位点的任何载体)、无缝(没有额外的bp或氨基酸添加到目标抗体)、定向和高通量(HTP)准备。一些出版物利用融合内克隆技术进行HTP抗体片段克隆,因为其克隆效率和准确性较高(Spidel等人,2016年;Chen等人,2014年;Meng等人,2015年)。
经过表达构建和下游表达的目的抗体,我们的下一代Capturem蛋白A和Capturem蛋白G该技术可用于快速(5-15分钟)和容易的无树脂纯化高质量和浓缩的单克隆/多克隆抗体。我们革命性的capture Protein A和G技术由含有蛋白A或G功能化的高容量膜的旋转柱或平板组成(图1),允许在几分钟内直接从复杂的基质(如杂多瘤上清液或血清)中纯化抗体。capture Protein A和capture Protein G技术可用于微孔、最大孔和96孔/24孔板格式,是杂交瘤克隆快速HTP筛选的理想选择。
图1所示。捕获蛋白A和蛋白G技术。Capturem蛋白A和G mini/maxi旋转柱或96孔/24孔板包含高容量3D尼龙膜(包括固定化蛋白质的一个或G蛋白质,每毫升膜比每毫升树脂提供更高的蛋白质结合能力。
引用融合内克隆用于HTP抗体克隆的抗体治疗学参考文献和选定出版物
陈志光。et al。一步零背景IgG重组噬菌体显示的抗体片段,实现快速和高通量先导物鉴定。Nuc。酸Res。42,e26(2014年)。
孟,W。et al。从单个恒河猴抗体分泌细胞高效生成单克隆抗体。马伯7.707 - 718(2015)。
Spidel, j·L。et al。在HEK293细胞中快速高通量克隆和稳定表达抗体。j . Immunol。方法439年,- 58(2016)。
塔库尔,A。et al。基于双特异性抗体的疗法:优势和挑战。血转速.2,004 (2018).
世界,东德。et al。肿瘤学中的抗体治疗。免疫疗法,打开2,108(2016)。
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