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选择检测测定的最佳样品预备方法

基于核酸的方法用于检测各种样品类型中的病毒和细菌病原体,包括临床研究和环境样品。检测方法的准确性和效率如实时定量PCR(RT-QPCR)分析和基于PCR的基因分型通常难以纯化来自待分析的样品的高质量RNA和DNA。重要的是选择一种适用于给定样品类型和生物的纯化方法,简单且足够快,以避免显着增加完成检测测定所需的时间,并适用于所处理的样品数量和样品数量。

二氧化硅膜 - 和基于磁珠的技术允许在不同的吞吐量使用手动或自动处理的病毒和微生物核酸的快速纯化。这些技术已被纳入多功能含有难裂解的微生物适用于广泛范围的样品,以及专门的试剂盒设计用于特异性纯化格式和样品类型,如粪便,土壤,和水样的试剂盒。或者,一些RT-qPCR的方法非常适合于从粗提取物中的小规模检测,消除了现有的DNA或RNA分离完全的需要。

请参阅以下相关例子,并查看我们的选择指南寻找适合您应用的最佳核酸纯化试剂盒。

请注意,machery - nagel核酸纯化产品仅在北美、印度和日本的Takara Bio提供。bet188手机端


准备用于病毒检测的临床研究样本

bet188手机端Takara Bio提供二氧化硅膜和磁珠为基础的技术,用于从无细胞的体液中纯化病毒核酸,如血清或血浆,血液,均质组织和粪便样本悬液,以及拭子清洗NucleoSpin RNA病毒和核磁病原体板。两种试剂盒都包含简单,快速的裂解程序,使从RNA和DNA病毒有效分离核酸,而NucleoMag病原体提供了更多的多功能性提取细菌DNA。提取的核酸分别与二氧化硅膜或顺磁珠结合,经过顺序洗涤步骤,然后在低盐条件下洗脱。而核ospin二氧化硅膜技术可用于单准备和多准备格式(Nucleospin 8/96病毒套件年代)针对不同的吞吐量需求,主要开发了NucleoMag病原体试剂盒,用于在许多常见的自动化平台上进行高吞吐量处理。下表比较了这三种工具包的特点。

NucleoSpin RNA病毒 Nucleospin 8/96病毒* 核磁病原体
技术 硅胶膜 硅胶膜 磁珠
格式 迷你旋转柱 8孔条/ 96孔板 高活性超顺磁珠
加工 小型手动处理 高吞吐手动或自动化处理* 高通量手动或自动化处理
原料 150微升 150微升 <200μl.
(PREP是完全可扩展)
片段大小 100 bp-30 kb 100 bp-30 kb 300 bp-〜50 kb
洗脱量 50μl. 70 - 100µl 50-100μl.
准备时间 30分钟/ 4 - 6预备 60分钟/ 6条
60分钟/板
45 - 120分钟/ 96预备
(例如,翠鸟45分钟)

* Nucleospin 8病毒和核棘素96病毒以离心机或真空进行手动样品处理。Nucleospin 8/96病毒芯套件不包括手动使用所需的组件,主要用于真空自动样品加工。

这些试剂盒可产生高质量的病毒核酸,可用于多种样本类型的检测分析。它们能够从鼻咽和口咽拭子、痰液和其他体液等临床研究样本中有效分离病毒核酸。我们提供从这类样本中分离核酸的指南适用于SARS-CoV-2研究应用。核ospin RNA病毒试剂盒也被证明可用于HCV、HIV、HPV、禽流感病毒和蓝舌病毒,并可通过添加蛋白酶K消化步骤用于纯化HBV DNA。NucleoMag病原体试剂盒也可以从大量的病毒和细菌中纯化核酸。结果显示,它在更敏感的基于pcr的五种常见病原体(诺如病毒,艰难梭状芽胞杆菌在两个试剂盒中用于从粪便样品中提取核酸后,Astrovirus,腺病毒和轮状病毒(图1)。

人类粪便标本病原菌检测的敏感性筛选。

图1所示。人类粪便标本病原菌检测的敏感性筛选.稀释级数10-3-10年-4粪便样品都为灵敏度使用三个重复筛选制备。用核磁病原体试剂盒和竞争对手试剂盒“R”进行核酸萃取。使用RIDA基因的病毒凳面板I(R-Biopharm公司)和REALSTAR进行PCR分析艰难梭状芽胞杆菌PCR试剂盒1.0(阿尔托纳Diagnostics)上。


环境样品中微生物DNA和RNA的分离

bet188手机端Takara Bio还提供专门的套件,可有效地将病毒核酸与水,空气和土壤等环境样品分离。磁珠基核磁DNA / RNA水套件实现高效,高通量DNA和RNA的从不同的水和空气样品隔离。该协议结合了用于最佳裂解陶瓷珠均质化和有效地除去抑制性化合物,以确保下游检测的最佳性能。这种多用途的试剂盒中所示,得到的是可以从选择使用PCR测定法(图2)的各种水和空气采样来有效地检测微生物DNA。

高效检测不同水和空气样品中的微生物DNA

图2。高效检测不同水和空气样品中的微生物DNA。使用核磁DNA / RNA水试剂盒从各种过滤水和空气样品中提取DNA,并通过PCR分析。可以对所有样品有效地测量微生物DNA,证明了核磁DNA / RNA水试剂盒的多功能性。

其他套件,如NucleoBond RNA土壤和核盈宝rna凳子,可用于从水样中分离病毒核酸。我们提供一般建议用于从水样中分离病毒核酸,如SARS-CoV-2 RNA。


粗提物中病原菌的直接检测

直接RT-QPCR可用于直接从各种粗糙生物样品中检测病原体,消除了RNA纯化的需要。我们的primedirect探针RT-QPCR混合可用于直接RT-qPCR检测,因为它对肝素(血液)和腐殖酸(土壤)等多种PCR抑制剂具有高抗性。这种主混合,用于执行高灵敏度的基于荧光探针的分析,使直接一步检测在单一管,显著减少动手时间和污染的风险。使用这种混合物进行的H1N1检测显示高度敏感,在鼻腔拭子样本和唾液样本中检测到20个拷贝病毒,在口腔样本中检测到2个拷贝病毒(图3)。

PrimeDirect Probe RT-qPCR Mix能够直接从生物样本中检测病毒RNA

图3. primedirect探针RT-QPCR混合物能够直接从生物样品中检测病毒RNA。鼻腔拭子和唾液标本的检测灵敏度为20份,口腔拭子标本的检测灵敏度为2份。

bet188手机端Takara Bio也提供用于SARS-COV-2的直接单步RT-QPCR混合,一种专门的一步RT-QPCR主混合物,允许在简单,快速的协议中直接检测来自未纯化的唾液样品 - 只需混合样品和预处理试剂,热处理,然后与RT-结合QPCR主混音。通过检测到预处理的整个协议需要不到一小时,并且包括多路复用SARS-COV-2检测的准则。该主混合物基于特殊敏感的步骤primescript III RT-QPCR混合物,可在粗唾液样品中提供SARS-COV-2 RNA的可靠检测。


特色产品

猫。# 产品 大小 许可证 数量 细节
638329 用于SARS-COV-2的直接单步RT-QPCR混合 200 rxns. *

bet188手机端Takara Bio的Direct One-Step RT-qPCR Mix用于SARS-CoV-2,允许在未经纯化的唾液样品中检测SARS-CoV-2,并使用所含的样品准备液(不单独出售)进行预处理。

猫。638329号为200个25- μ l反应提供了足够的试剂。

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我们的产品将用于研究只使用.它们不得用于任何其他目的,包括但不限于人类使用、治疗或诊断用途,或任何类型的商业用途。未经我们事先书面批准,不得将我们的产品转让给第三方、转售、修改用于转售,或用于制造商业产品或向第三方提供服务。

文档 成分
740140.20 NucleoBond®RNA土壤 20周的Preps *

核心RNA土套件采用阴离子交换色谱和二氧化硅旋纯化,用于分离来自土壤和沉积物样品的RNA,并且可以与核官能RNA土壤的DNA组合使用,以获得来自相同样品的DNA和RNA。用这些试剂盒纯化的核酸适用于偏见研究,包括基因组和转录组分析。与DNA相比,大多数土壤含有相对较少量的RNA。因此,该试剂盒设计用于容纳高样品输入,以产生1-10μg的RNA。使用Mn珠子管的样品裂解在优化的裂解缓冲液E1和酚:氯仿:异戊醇确保有效的样品中断。可选的缓冲液可从矿床和有机土壤样品中获得高效的RNA和DNA纯化。Nucleobond RNA土可以在大约1小时内手动处理12个样品。该试剂盒包括足够的试剂和用于加工20个样品的材料。

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NucleoBond RNA土壤过程

NucleoBond RNA土壤过程

NucleoBond RNA土壤过程。

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高RNA产量与核键RNA土壤

高RNA产量与核键RNA土壤

高RNA产量与核官能RNA土壤。不同的土壤样品(粘土、海岸土壤和森林土壤)用NucleoBond RNA soil使用标准试剂盒协议进行双重纯化。为了比较,采用竞争对手试剂盒“Q”和相应试剂盒方案并行处理样品。每个RNA样品以100µl的体积洗脱,光度法测定产量(左图)。另外,通过凝胶电泳分析15μl每种洗脱液(1%TAE;右侧面板)。对于每个样品类型,NucleoBond RNA Soil提供了比竞争对手试剂盒更高的产量。

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可用于完美效果的可增加RNA与核核滨RNA土壤

可用于完美效果的可增加RNA与核核滨RNA土壤

可扩增的RNA与核结合RNA土壤的完美结果。使用NucleoBond RNA soil和竞争对手试剂盒“Q”,按照每个试剂盒的标准协议,对各种土壤样品(粘土、海岸土壤和森林土壤)进行重复纯化。然后用40µl洗脱液进行RT-PCR(扩增子大小= 466 bp)。使用NucleoBond RNA Soil制备的样品与使用试剂盒“Q”制备的样品相比,Cp值较低。

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核结合RNA土壤使高效的平行DNA分离

核结合RNA土壤使高效的平行DNA分离

核结合RNA土壤使高效的平行DNA分离。各种土壤样品(粘土,岸土壤和森林土)在以下的标准试剂盒方案重复使用NucleoBond RNA土壤与DNA集的NucleoBond RNA土壤组合进行纯化。为了比较,使用竞争对手套件“Q”和相应的协议并行处理样品。DNA样品以100μl的体积洗脱,并测定光学(左面板)的产率。另外,通过凝胶电泳分析15μl每种洗脱液(1%TAE;右侧面板)。对于每个样品类型,NucleoBond RNA土壤与DNA集的NucleoBond RNA土壤组合提供的DNA的更高的产率相比,竞争者试剂盒。

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740140.2:核胚芽RNA土壤

740140.2:核胚芽RNA土壤
744220.1 NucleoMag®DNA / RNA水 1 x 96准备 *

所述NucleoMag DNA / RNA试剂盒水采用磁珠技术使得能够从使用手动或自动处理多样的空气和水的样品的微生物的DNA和RNA的有效分离。该试剂盒是具有各种过滤器和过滤系统兼容,并且可以被用来处理盐或淡水的样品从混浊至澄清。该试剂盒协议使得有效地去除,同时避免了使用还原剂的可能与下游检测干扰抑制性化合物,并且还允许使用MN珠管以改善样品裂解均质化步骤的掺入。纯化的DNA,并用该试剂盒获得的RNA适合于下游应用如定量PCR和NGS。

猫。# 744220.1包括足够数量的试剂和材料处理1 × 96个样品。

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使用NucleoMag SEP对96个样品进行手工处理的NucleoMag DNA/RNA水协议概述

使用NucleoMag SEP对96个样品进行手工处理的NucleoMag DNA/RNA水协议概述

NucleoMag DNA / RNA水协议的使用NucleoMag SEP 96个样品手工处理的概述。

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高效检测不同水和空气样品中的微生物DNA

高效检测不同水和空气样品中的微生物DNA

高效检测不同水和空气样品中的微生物DNA。过滤各种水样和空气样品,通过PCR分析与核磁DNA / RNA水试剂盒提取的DNA。可以对所有样品有效地测量微生物DNA,证明了核磁DNA / RNA水试剂盒的多功能性。

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用不同的均质化装置的兼容性

用不同的均质化装置的兼容性

用不同的均质化设备的兼容性。核酸从掺料或无稀释剂的自来水样品中提取与包含任一涡旋精灵2装置上的均化步骤(使用MN珠试管支架)或专用仪器(Retsch公司)的,并通过qPCR测量所得的产率。二者均化办法,得到每个样品类型可比较的结果,表明NucleoMag DNA / RNA水试剂盒在问候其兼容性与相应的均化装置的灵活性。

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兼容不同的过滤系统

兼容不同的过滤系统

用不同的过滤系统的兼容性。使用NucleoMag DNA/RNA Water kit从圆形过滤器或盒状系统中分离核酸进行qPCR。每一准备液的CT值都相当,证明了试剂盒的通用性,为每个过滤系统提供了有效的样品处理。

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高效去除PCR抑制剂

高效去除PCR抑制剂

高效除去PCR抑制剂。将提取的三种不同样本(池塘、海水和湖泊)的核酸进行连续稀释,并进行qPCR分析。抑制图的线性表明每个样品没有PCR抑制。

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流行平台自动处理

流行平台自动处理

流行平台自动化处理。使用NucleoMag DNA/RNA Water kit从两个不同的水样中纯化核酸,分别使用两个不同的自动化平台,KingFisher(磁棒)和epMotion(液体处理)。纯化后的核酸的qPCR分析表明,从每个样品中获得的产量相当,表明试剂盒对两种自动化方法的适应性。

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744220.1: NucleoMag DNA/RNA Water

744220.1: NucleoMag DNA/RNA Water
744210.1 NucleoMag®病原体 1 x 96准备 *

核磁病原体试剂盒设计用于从无细胞体液中分离病毒RNA和DNA和细菌DNA,例如血清或血浆,血液,均化组织样品悬浮液,粪便样品悬浮液和拭子洗涤。该套件提供试剂和磁珠,用于分离96个样品。

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用于高通量核酸纯化的磁性分离器

用于高通量核酸纯化的磁性分离器

该磁选机是为高通量核酸纯化而设计的。

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灵敏度筛选人类粪便样品中的病原体检测

灵敏度筛选人类粪便样品中的病原体检测

人类粪便标本病原菌检测的敏感性筛选。稀释级数10-3-10年-4使用三种重复制备粪便样品用于敏感性筛选。用核磁病原体试剂盒和竞争对手试剂盒“R”进行核酸萃取。使用rida基因病毒粪池I(R-Biopharm)和真实梭菌差异PCR套件1.0(Altona诊断)进行PCR分析。

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乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)敏感性筛查

乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)敏感性筛查
乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)的敏感性筛查。稀释系列(1:10)人血浆(200�l,原始病毒滴度如图)用NucleoMag病原体试剂盒提取三份,并用RealStar HBV PCR kit 1.0和HCV RT-PCR kit 1.0 (Altona Diagnostics)进行测试。该试剂盒对人类血浆样品中的乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)检测具有足够的敏感性。内部控制按预期得到了提取和恢复。未检测到PCR抑制剂。

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可靠的病毒RNA检测

可靠的病毒RNA检测
可靠的检测病毒RNA的。甲诺如病毒阳性粪便样品和样品的各种稀释液进行处理用于使用NucleoMag病原体的试剂盒和试剂盒的竞争者“R”病毒RNA纯化。纯化病毒RNA通过qPCR分析。

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从人拭子样品中卓越地检测SARS-COV-2

从人拭子样品中卓越地检测SARS-COV-2

使用核磁病原体和竞争对手试剂盒(Q)重复提取来自19个确认的SARS-COV-2阳性拭子样品的病毒RNA。使用SARS-COV-2特异性QRT-PCR测定量定量病毒RNA(QScript TM XLT一步RT-QPCRTOGPMIX®+ NCOV IP4测定;研究所巴斯特,巴黎)。对于测试的每个样品,所得到的CT值表明,进行的核磁病原体套件以及(3/19样品)或比竞争对手套件更好(16/19样品)。对于测试的两个样品,可以使用核磁病原体进行SARS-COV-2 RNA的检测,但不具有竞争对手试剂盒。

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利用NucleoMag病原菌对不同样本提取的SARS-CoV-2 RNA进行一致的qRT-PCR扩增

利用NucleoMag病原菌对不同样本提取的SARS-CoV-2 RNA进行一致的qRT-PCR扩增

用灭活的SARS-CoV-2病毒对三种不同类型的样本(鼻拭子、口腔拭子、唾液)进行稀释。使用NucleoMag Pathogen在KingFisher Flex系统上提取病毒RNA,并通过qRT-PCR (AgPath-ID™One-Step RT-PCR mix + nCoV IP4 assay,巴黎巴斯德研究所)对RNA进行定量。对于每一种样本类型,病毒RNA检测一致可靠,稀释范围为5 log。

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从人类唾液样本中检测SARS-CoV-2的优势

从人类唾液样本中检测SARS-CoV-2的优势

将病毒RNA从200-μL输入中提取,稀释的SARS-COV-2阳性唾液样品,分别使用核磁病原体(Mn)和Magmax TM病毒RNA分离试剂盒(T),并通过QRT-PCR定量。对于分析的每种稀释,与Magmax试剂盒相比,核磁病原体提供了优异的测定敏感性。

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744210.1:核磁病原体

744210.1:核磁病原体
740643 nucleospin®8病毒 12 x 8准备 *

产品描述:NucleoSpin 8 Virus (12 x 8) 12 x 8 preparation for isolation of viral RNA and DNA - NucleoSpin Virus Binding strip, MN Square-well block, Racks of Tube strip, self - attached foil, Buffers, Carrier RNA, Proteinase klq Limited quantity or

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核ospin 8/96病毒程序

核ospin 8/96病毒程序
核ospin 8/96病毒程序。

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740643:核旋蛋白8病毒

740643:核旋蛋白8病毒
740691.2 NucleoSpin®96病毒 2 x 96个准备 *

Nucleospin 96病毒(2 x 96)2 x 96制备病毒RNA和DNA - 核源末端病毒结合板,Mn平方孔块,圆孔块,管条齿条,自粘附箔,缓冲液,载体RNA,蛋白酶K.

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核ospin 8/96病毒程序

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核ospin 8/96病毒程序。

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740691.2:核旋蛋白96病毒

740691.2:核旋蛋白96病毒
740130.10 NucleoSpin®RNA凳子 10个准备 *

核源RNA粪便试剂盒设计用于高效地分离RNA,包括小RNA物种,来自新鲜和冷冻的粪便样品。该试剂盒采用含有迷你旋转柱状的二氧化硅膜技术,通常产生10-30μg的RNA,从200mg的新鲜或冷冻粪便输入。套件工作流程允许在大约70分钟内并联处理10个样本。

猫。#740130.10包括足够量的试剂和用于加工10个样品的材料。

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NucleoSpin RNA凳子程序

NucleoSpin RNA凳子程序

核旋蛋白RNA粪便程序。

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最高产量与核旋蛋白RNA粪便

最高产量与核旋蛋白RNA粪便

最高产量与核旋蛋白RNA粪便。使用包括柱DNA酶消化步骤的标准方案,在收集后4小时内处理两种人凳样品。如相应方案所示,使用核棘素RNA粪便(“Mn”)处理200mg粪便样品,而用竞争对手试剂盒加工250mg样品。对于“Q”,包括任选的酚类裂解步骤。对于每个样品和方案,提取以三份进行。对于每个样品,与竞争对手试剂盒相比,核源RNA稳定率为20-60%的产率。

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最高的RNA纯度和与核盈宝RNA粪便的完整性

最高的RNA纯度和与核盈宝RNA粪便的完整性

最高的RNA纯度和与核盈宝RNA粪便的完整性。使用包括柱DNA酶消化步骤的标准方案,在收集后4小时内处理两种人凳样品。如相应方案所示,使用核棘素RNA粪便(“Mn”)处理200mg粪便样品,而用竞争对手试剂盒加工250mg样品。对于“Q”,包括任选的酚类裂解步骤。对于每个样品和方案,进行四种提取物。对于每个样品,核源的RNA粪便产生最高纯度的RNA(a260./一个280.与竞争对手的套件相比,完整性(RIN,底部)。

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核旋蛋白RNA Stool在qPCR中表现最好

核旋蛋白RNA Stool在qPCR中表现最好

NucleoSpin RNA凳子显示qPCR的最佳性能。使用包括柱DNA酶消化步骤的标准方案,在收集后4小时内处理两种人凳样品。如相应方案所示,使用核棘素RNA粪便(“Mn”)处理200mg粪便样品,而用竞争对手试剂盒加工250mg样品。对于“Q”,包括任选的酚类裂解步骤。对于用核源RNA粪便和方案“Q”加工的样品,在100μl体积中洗脱RNA,而来自方案“Z”的洗脱液将各自调节至100μL的最终体积以获得各方案的可比RNA浓度。对于每个样品和方案,提取以三份进行。对于每个样品,与用竞争对手试剂盒制备的RNA相比,用核棘素RNA稳定获得的RNA在QPCR中提供了更好的性能。

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740130.10: NucleoSpin RNA Stool

740130.10: NucleoSpin RNA Stool
740956.10 NucleoSpin®RNA病毒 10个准备 *

核磷脂RNA病毒设计用于从血清,血浆或非无细胞生物液中分离病毒核酸。

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核旋蛋白RNA病毒程序

核旋蛋白RNA病毒程序
NucleoSpin RNA病毒程序。

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740956.10:核盈突RNA病毒

740956.10:核盈突RNA病毒
RR650A Primedirect™探针RT-QPCR混合 200 rxns. *

Primedirect探针RT-QPCR混合物专为一步,实时RT-PCR通过探针检测(5'-核酸酶方法)。该产品作为2x预混物供应,以方便易于制备反应混合物。它只需要添加引物,探针和样品,并且可以通过简单地将样品直接添加到反应混合物中而无需介入核酸纯化步骤来进行。因为该产品对血液和土壤中各种PCR抑制剂具有高度抗性,所以它可用于直接检测各种生物标本中的病原体,包括病毒和细菌,并直接分析细胞中的基因表达。

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RR650A: PrimeDirect Probe RT-qPCR Mix

RR650A: PrimeDirect Probe RT-qPCR Mix

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bet188手机端188足彩网站Takara Bio USA,Inc。提供帮助研究人员探索关于基因发现,监管和功能问题的套件,试剂,仪器和服务。作为Takara Bio Group的bet188手机端188bet体育成188金宝搏登录网址员,TBUSA是拥有全球市场领导地位的公司的一部分,致力于通过生物技术改善人类状况。我们的使命是开发高质量的创新工具和服务,以加速发现。

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