胞外囊泡分离常问的问题GydF4y2Ba

捕获EV自旋柱包含膜，是与凝集素基底物功能化，结合细胞外囊泡。GydF4y2Ba

• 超速离心根据密度分离颗粒。因此，它将其分离出不同尺寸的混合囊泡，以及非EV污染物，例如白蛋白等蛋白质。由于高速，这个过程非常苛刻，往往会损害EVS。GydF4y2Ba
• Capturem细胞外囊泡隔离试剂盒具体地分离小于200nm的EVS直径。该过程温和，EVS保持完整的下游应用，例如电子显微镜。GydF4y2Ba

捕获EV色谱柱提供了高纯度的EV样品，没有污染的蛋白质。超离心法得到的样品中含有杂质，如白蛋白。因此，由于这些杂质，超离心法会得到更高的总蛋白浓度。GydF4y2Ba

我们的试剂盒使用含有有机盐的磷酸盐缓冲液洗脱电动汽车。洗脱颗粒可直接用于物理颗粒分析，如纳米颗粒跟踪分析(NTA)和细胞摄取测定标记。如果您的下游应用涉及蛋白质和/或RNA提取，将有必要先超声或淡化洗脱样品。GydF4y2Ba

是的，你可以用甘露糖或葡萄糖缓冲液进行竞争洗脱。然而，这将降低您的EV产量，您将需要确定这些缓冲区是否与下游应用程序兼容。GydF4y2Ba

是的。我们将样品在水超声器(超声波清洗机，JSP)中20°C超声5分钟。如果您正在使用不同的声波发生器，则可能需要进行优化。GydF4y2Ba

我们建议以下步骤：GydF4y2Ba

1. 在Amicon Ultra-0.5离心过滤器单元(3-kDa或10-kDa MWCO，由用户提供)上装载与迷你工具包获得的整个样品(或与maxi工具包获得的500µl样品)。如果样品体积小于500µl，向过滤单元加水使体积达到500µl。离心机在14000GydF4y2BaGGydF4y2Ba静置5-30分钟，弃掉流道。GydF4y2Ba
2. 向过滤单元加水，使体积达到500µl，并在14000离心GydF4y2BaGGydF4y2Ba5-30分钟。GydF4y2Ba
3. 将保留液(过滤器中的样品)转移到一个新的2ml收集管(由用户提供)。GydF4y2Ba
4. 对于用maxi试剂盒获得的样品，用剩余的500µl样品重复步骤1-3。GydF4y2Ba

这个数字可以根据输入样本类型、体积和条件而变化。根据我们的经验，从1ml血浆中回收的EV可从EV货物中提取约1ng的RNA和5µg的蛋白质。GydF4y2Ba

从1毫升等离子体，Capturem EV Maxi柱给出了EV产量，即比迷你柱大的10倍。Capturem EV Maxi列以其最大容量，给出了〜10的EV产量（EV总数）GydF4y2Ba^11GydF4y2Ba。GydF4y2Ba

预清除柱去除任何大膜片段，凋亡体，较小的细胞片段等，否则将堵塞Capturem柱并防止EV隔离。GydF4y2Ba

过滤单元去除非特异性蛋白聚集物、脂蛋白、细胞因子等，通过荧光纳米颗粒跟踪分析获得更高纯度的ev。GydF4y2Ba

购买AMICON Ultra-0.5离心式过滤装置（Thermo Fisher Scientific，Cat。＃UFC510024），拥有100 kda MWCO。请务必按照我们的协议中所述使用过滤器。GydF4y2Ba

你可以使用蛋白酶K，但它可能会导致暴露在电动汽车表面的蛋白质的部分降解，因此影响你在下游分析中检测这些蛋白质的能力。GydF4y2Ba

是的，你可以使用一个摆动桶转子或一个固定角度转子。GydF4y2Ba