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实时聚合酶链反应

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qPCR反应大小指南

实时荧光定量PCR (Real-time PCR, qPCR)是一种强大的样品分析技术，用于定量靶序列或基因表达。qPCR通常使用的反应包括样品模板、主混合、正向和反向引物，通常还包括在pcr级水中稀释的ROX参考染料。每个反应的体积取决于实验条件，特别是所使用的平板或系统中储液器的大小。例如，96孔板通常使用20 μl的反应，384孔板通常使用10 μl的反应，1536孔板通常使用2 μl的反应，以及高通量系统，如SmartChip Real-Time PCR系统，利用容量低至100 nl。

通常情况下，试剂盒和主混合剂根据反应的数量报告产品大小。然而，如上所述，反应体积可能是不同的，根据所使用的反应体积，给定试剂盒的反应数量会有所不同。这可能会更加复杂，取决于初始主混合的浓度(例如，2X, 5X，等等)。为了帮助明确从一个试剂盒中可以得到多少反应，我们提供了下面的表格(根据一般产品类型分开)。每一项都列出了具体的目录数，包括主混合料的总体积和浓度，以及根据经常使用的反应体积得到的反应数量。

一步RT-qPCR包两步RT-qPCR包 Probe-based qPCR包 TB绿色染料qPCR试剂盒

一步RT-qPCR包

一步逆转录试剂盒在与qPCR反应相同的试管中执行逆转录酶步骤。我们提供探针和结核绿色检测试剂盒。包括的所有主混音都是2X格式。

一步PrimeScript RT-PCR试剂盒（完美实时）：基于反应体积的反应数

目录#	2X主混合音量	50 -µl rxns	25 -µl rxns	20 -µl rxns	10 -µl rxns	5 -µl rxns	2 -µl rxns	1 -µl rxns
RR064A	3 x 840µl(2.52毫升)	One hundred.	200	250	500	1，000	2，500	5，000
RR064B	15 x 840µl(12.6毫升)	500	1，000	1250年	2，500	5，000	12500年	25，000

一步TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time):反应数量根据反应量

目录#	2X主混合音量	50 -µl rxns	25 -µl rxns	20 -µl rxns	10 -µl rxns	5 -µl rxns	2 -µl rxns	1 -µl rxns
RR086A	3 x 840µl (2.52 ml)	One hundred.	200	250	500	1，000	2，500	5，000
RR086B	15 x 840µl (12.6 ml)	500	1，000	1250年	2，500	5，000	12500年	25，000

两步RT-qPCR包

两步逆转录试剂盒执行逆转录酶步骤生成cDNA，然后将cDNA添加到PCR中，可以与我们的探针和染料型qPCR试剂盒结合进行全面分析。所有主混音都是5X格式的。

PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)、PrimeScript RT Reagent Kit (Perfect Real Time)、PrimeScript RT Reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time):根据反应体积计算反应次数

目录#	5X主混合体积	50 -µl rxns	25 -µl rxns	20 -µl rxns	10 -µl rxns	5 -µl rxns	2 -µl rxns	1 -µl rxns
RR036A	400微升	40	80	One hundred.	200	400	1，000	2，000
RR036B	4 x 400 μ l (1.6 ml)	160	320	400	800	1，600	4，000	8，000
RR037A	400微升	40	80	One hundred.	200	400	1，000	2，000
RR037B	4 x 400 μ l (1.6 ml)	160	320	400	800	1，600	4，000	8，000
RR047A	400微升	40	80	One hundred.	200	400	1，000	2，000
RR047B	4 x 400 μ l (1.6 ml)	160	320	400	800	1，600	4，000	8，000

Probe-based qPCR包

我们基于探针的qPCR试剂盒具有很高的特异性、敏感性和重现性。所有主混音都是2X格式。

预混料Taq交货DNA聚合酶(完美实时)，预混Taq交货(探针qPCR),预混料Taq交货(Probe qPCR)， ROX Plus:根据反应体积计算的反应数量

目录#	2X主混合音量	50 -µl rxns	25 -µl rxns	20 -µl rxns	10 -µl rxns	5 -µl rxns	2 -µl rxns	1 -µl rxns
RR039A	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR039B	2 x 5 ml (10 ml)	400	800	1，000	2，000	4，000	10，000	20，000
RR039W	25毫升	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年
RR390A	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR390B	2 x 5 ml (10 ml)	400	800	1，000	2，000	4，000	10，000	20，000
RR390L	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR390W	5 x 5 ml (25 ml)	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年
RR39LR	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR39WR	5 x 5 ml (25 ml)	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年

TB绿色染料qPCR试剂盒

我们的基于染料的qPCR试剂盒使用我们专有的TB Green插层染料。这种多功能染料可以用正常的方法和设备使用，不需要修改协议。所有主混音都是2X格式。

TB Green Advantage qPCR预混料和Terra qPCR Direct TB Green预混料：基于反应体积的反应数

目录#	2X主混合音量	50 -µl rxns	25 -µl rxns	20 -µl rxns	10 -µl rxns	5 -µl rxns	2 -µl rxns	1 -µl rxns
639676	4 x 250µl (2.5 ml)	One hundred.	200	250	500	1，000	2，500	5，000
638319	5 x 1 ml (5 ml)	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000

结核病绿色预混料Taq交货(Tli RNase H Plus)和TB绿色预混料Taq交货II (Tli RNase H Plus):根据反应体积计算的反应数

目录#	2X主混合音量	50 -µl rxns	25 -µl rxns	20 -µl rxns	10 -µl rxns	5 -µl rxns	2 -µl rxns	1 -µl rxns
RR420A	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR420B	2 x 5 ml (10 ml)	400	800	1，000	2，000	4，000	10，000	20，000
RR420L	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR420W	5 x 5 ml (25 ml)	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年
RR42LR	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR42WR	5 x 5ml (25ml)	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年
RR820A	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR820B	2 x 5 ml (10 ml)	400	800	1，000	2，000	4，000	10，000	20，000
RR820L	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR820W	5 x 5 ml (25 ml)	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年
RR82LR	5毫升	200	400	500	1，000	2，000	5，000	10，000
RR82WR	5 x 5 ml (25 ml)	1，000	2，000	2，500	5，000	10，000	25，000	50000年

高通量实时聚合酶链反应

在吞吐量满足灵活性的地方

实时荧光定量PCR (Real-time PCR, qPCR)是一种有效的基因分型和基因表达分析技术。目前，qPCR实验正变得越来越复杂——包括从更多样本中获得的广泛且不断增长的目标列表，所有这些都具有更多的技术重复。SmartChip Real-Time PCR系统是一个完整的高通量解决方案，能够实现无与伦比的灵活的分析和样品格式，允许研究人员无缝切换，将分析试剂和样品分配到空白芯片，或将样品分配到定制的预打印芯片，而无需重新验证。

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