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干细胞应用

获得药物开发中内在清除的准确预测

阿斯利康公司的内在清除的研究提供了Cellartis电力主HEP中下载的应用程序数据»

制药行业的共同目标是开发代谢缓慢的新药,以延长药物的半衰期。这样做将减少所需的剂量,这将对慢性疾病患者的生活质量产生深远的影响(la Hultman et al. 2016)。然而,这类被称为低清除化合物的药物,由于难以准确确定它们从体内清除的速度,在临床上正处于失败状态。通常,低清除率化合物的清除率被高估,导致对临床半衰期的严重低估,这可能与药物的预期用途不兼容。因此,准确测量药物清除率的能力对药物开发和安全、准确的给药至关重要。

药代动力学是如何通过身体的药物移动学习是了解如何快速地将药物从体内清除重要。它包括以下四个步骤:吸收,分布,代谢和排泄。药物代谢主要发生在肝脏和是通过药物从身体消除的主要机制。药物的损失,因为它穿过肝脏被称为肝清除-的关键因素在确定身体多久药物停留,因此,其效果的持续时间(Zhang等人。2012)。

药代动力学:吸收,分布,新陈代谢和排泄

用户改编自用户:Ladyofhats / Wikimedia Commons / Public Domain

肝血流速率(其反映到肝脏的递送药物),以及如何有效地将药物从血液中除去:肝清除率是由两个因素的影响。的肝提取率是除去药物从血液(克拉克2013)的效率的指示。萃取率是依赖于1)药物的分数可免费获得用于与肝酶和2)肝酶代谢可免费获得的药物,被称为固有清除率的性质的能力相互作用(CLint)。具有高提取率药物称为高间隙药物和迅速从体内消除。相比之下,药物具有低提取比例被称为低清除药物从身体正在慢慢消除由于肝脏的低的内在能力,代谢并排出这些药物。

肝脏清除

预测低清除率药物内在清除率的挑战

预测在活的有机体内基于从数据药物的清除体外模型是一个挑战。这个预测更加努力,为低清除药物由于存在的局限性体外系统和测定法,诸如缺乏敏感性的检测低CLint价值观。例如,确定CL的最常用方法int值是悬浮肝细胞间隙测定。悬浮肝肝细胞在四小时后迅速丧失酶活性和活力,因此间隙测定中的孵育时间限制在最多4小时。低间隙药物需要长孵育,因此,悬浮肝间隙测定法不适合确定CLint低清除率药物的价值。

几种新的方法已经开发了用于确定CLint低清除率药物的价值。例如接力法,将悬浮肝细胞与药物孵育4小时,然后将药物上清转移到新鲜解冻的悬浮肝细胞中。这一过程重复五次,使药物暴露在肝酶中20小时。此外,能够长时间维持肝酶活性的细胞系和培养系统已经开发出来,并在低清除研究中进行了评估。这些包括单层培养的低温保存的原代肝细胞或HepaRG细胞,共培养肝细胞系统,如HepatoPac或HuREL,以及3D球形培养的原代肝细胞(Di和Obach 2015)。然而,这些方法可能复杂、耗时和昂贵,或者可预测性差在活的有机体内清除。因此,仍然需要一种内在清除的预测低清除药物的一个用户友好的,可靠的模型系统。

Cellartis Power Priain HEP​​培养基,用于预测内在清除

我们开发了Cellartis Power Priain HEP​​培养基,这是一种完整的培养基,其在常规的2D培养物中保持最多四周的健康,功能性的人原发性肝细胞 - 而无需覆盖或夹心培养。细胞具有正常的形态和稳定的白蛋白分泌,以及稳定的CYP活性和诱导的CYP表达。更重要的是,人的原发性肝细胞可以在Cellartis Power Priain Hep培养基中培养,长达10天,没有介质变化。这使得可以更准确地研究和测量低间隙化合物的内在间隙,而无需顺序介质变化或复杂的细胞培养系统。更准确体外系统允许更准确在活的有机体内预测,这对于确定患者的药物安全性和功效至关重要,并在临床中推进低间隙化合物。

来自Astrazeneca的应用数据

与AstraZeneca合作,我们进行了一种实验,以评估Cellartis Power Prial HEP培养基中培养的原发性肝细胞是否可以用作细胞模型以预测内在清除。对于第一次实验,我们使用药物奎尼丁,一种具有已知低固有间隙的化合物。该药主要由CYP3A4代谢。在这项研究中,含量分析奎尼丁浓度;1,3和5小时;孵育1,2,3,5,7,9和10天。预测的在活的有机体内CL.int基于计算的价值体外CL.int价值在非常良好的协议(在双重差异范围内)观察到的在活的有机体内CL.int价值。

注册以下载应用程序数据


参考文献

克拉克,C. W.肝药物清除。杜兰大学医学院,医学药理,TMedWeb。在

La Hultman.等等。用HμRER人类共培养系统的使用,以预测慢慢代谢化合物的内在间隙和代谢物形成。摩尔。制药。13,2796-2807(2016)。

DI,L.和Obach,R. S.解决了药物研究中低间隙的挑战。AAPS J.17,352 - 7(2015)。

张,D。等等。药物发现与开发中药物代谢与处置的临床前实验模型。APSB.2,549 - 561(2012)。

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