视频协议:使用CRISPR/Cas9和单细胞克隆编辑人类IPSC
我们从头到尾的编辑和单细胞克隆试剂盒使人类iPS细胞编辑成为例行公事,而不是令人沮丧。在这个视频协议中,我们提供了一步一步的指导,使用我们的完整系统生成编辑的人类iPS细胞系,以电穿孔为基础的RNP复合物传递和单细胞克隆。由于Cellartis DEF-CS培养系统,这种高效的工作流程大大提高了播种后单细胞的存活率。除了我们的电穿孔试剂盒,我们还提供一种使用gesicles来递送RNP复合物的替代试剂盒。
使用CRISPR/Cas9和人类诱导多能干细胞(hiPS)进行精确、无足迹的基因编辑的独特组合,使得生成疾病模型的复杂性达到了一个新的水平,以促进新疗法的快速发展。
我们的CRISPR/Cas9系统是一种简单的RNA可编程方法,用于介导哺乳动物细胞中的基因组编辑;它可用于在hiPS细胞中产生基因敲除(通过插入/删除)或敲除(通过HDR)。
使用CRISPR/Cas9和人类诱导多能干细胞(hiPS)进行精确、无足迹的基因编辑的独特组合,使得生成疾病模型的复杂性达到了一个新的水平,以促进新疗法的快速发展。
我们的CRISPR/Cas9系统是一种简单的RNA可编程方法,用于介导哺乳动物细胞中的基因组编辑;它可用于在hiPS细胞中产生基因敲除(通过插入/删除)或敲除(通过HDR)。一旦Cas9-sgRNA核糖核蛋白(RNP)复合物被递送,必须分离单个细胞并扩增成克隆细胞系,以分离和筛选感兴趣的基因型。传统上,从作为菌落生长和传代的细胞建立克隆群体效率低且耗时;通常,它会导致细胞死亡或过早分化。为了克服这一挑战,我们开发了一套完整的系统,该系统通过Cas9 sgRNA RNP复合物的高效传递,将无足迹基因编辑与hiPS细胞的单细胞克隆相结合。成功的单细胞克隆是通过使用我们的单层培养系统实现的,该系统通过允许单细胞传代、促进克隆存活和支持进一步克隆扩展而绕过了基于群体培养的挑战。
如果已经编辑了hiPS单元格,并且需要建立克隆,请选择:
要生成您自己编辑的克隆hiPS细胞系,请尝试我们的一个完整系统,其中包含Cas9 sgRNA RNP复合物输送系统(选择基于电穿孔或基于gesicle的输送)和Cellartis iPSC单细胞克隆DEF-CS培养基试剂盒:
有关储存条件、产品成分和技术规格的信息,请参阅产品分析证书。请参阅套件组件列表以确定套件组件。分析证书和套件组件列表位于“文档”选项卡下。
我们从头到尾的编辑和单细胞克隆试剂盒使人类iPS细胞编辑成为例行公事,而不是令人沮丧。在这个视频协议中,我们提供了一步一步的指导,使用我们的完整系统生成编辑的人类iPS细胞系,以电穿孔为基础的RNP复合物传递和单细胞克隆。由于Cellartis DEF-CS培养系统,这种高效的工作流程大大提高了播种后单细胞的存活率。除了我们的电穿孔试剂盒,我们还提供一种使用gesicles来递送RNP复合物的替代试剂盒。
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视频协议:使用CRISPR/Cas9和单细胞克隆编辑人类IPSC
我们从头到尾的编辑和单细胞克隆试剂盒使人类iPS细胞编辑成为例行公事,而不是令人沮丧。在这个视频协议中,我们提供了一步一步的指导,使用我们的完整系统生成编辑的人类iPS细胞系,以电穿孔为基础的RNP复合物传递和单细胞克隆。由于Cellartis DEF-CS培养系统,这种高效的工作流程大大提高了播种后单细胞的存活率。除了我们的电穿孔试剂盒,我们还提供一种使用gesicles来递送RNP复合物的替代试剂盒。